RNA提取和DNA提取 實驗在分子生物學中比較常用，但有時會出現(xiàn)產量低、純度低、易降解等情況，下面就實驗中常見問題及實驗過程中的注意事項做以匯總：

一、RNA提取和DNA提取實驗中常見問題

1.產量低

如果您遇到的 DNA/RNA 產量低于您對樣品的預期，則需要考慮許多因素。通常，這是一個裂解問題。不完全裂解是產量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的優(yōu)質乙醇（100% 200 標準）稀釋緩沖液或添加到結合的步驟。劣質乙醇或舊庫存可能已經吸收了水分，并且濃度不正確。如果洗滌緩沖液制備不正確，您可能正在洗掉提取的 DNA 或 RNA 。

2.低純度

如果提取的 DNA 被蛋白質污染（低 260/280），那么您可能開始時樣品過多，而蛋白質沒有完全去除或溶解。

如果 DNA 的 260/230 比率不佳，則問題通常是結合或洗滌緩沖液中的鹽分。確保使用最高質量的乙醇來制備洗滌緩沖液，如果問題仍然存在，請再次洗滌色譜柱。

與其他樣品相比，一些樣品含有更多的抑制劑。環(huán)境樣品特別容易出現(xiàn)純度問題，因為腐殖質在提取過程中會被溶解。

腐殖質的行為與 DNA 相似，很難從硅膠柱中去除。

3.降解

降解問題是RNA制備中常常到的問題。因為在 RNA 提取過程中，樣品儲存不當或裂解效率低等情況都會導致降解。 對于 DNA 提取，降解不是一個大問題，因為對于 PCR，DNA 可以被剪切并且工作正常，如果 不希望有較多剪切的 DNA，可以使用弱裂解的方法。

二、PCR 清理時的注意事項

PCR 凈化其實并不是 DNA 提取技術本身，但它是一種效率高且簡單的技術，它只是添加高濃度的結合鹽（通常每體積 PCR 反應 3-5 體積鹽）和離心來過濾。

在實驗過程中，PCR Clean-up 試劑盒出現(xiàn)故障也會導致整個實驗功虧一簣。

因為在PCR 反應中有較多吸收 260 度紫外線的物質，比如：核苷酸、去污劑、鹽和引物。所以，PCR 凈化試劑盒經常無法正常工作可能是由于 PCR 反應失敗所造一般成較難清理。

蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司13年來，致力于生物科學實驗室儀器設備及耗材供應。其中分子生物學產品，主要產品包括PCR儀、PCR 清潔試劑盒、天根試劑盒、DNA提取試劑盒、質粒提取等上百種實驗耗材，如果了解更多的PCR試劑盒及PCR 實驗相關內容可致電0512-62956104/18934597460進行咨詢。

蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團隊專注于科學儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術團隊與完善的售后服務體系，目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質產品和服務，涵蓋各大高校、檢測中心、科研機構、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機，天平，離心機，離心濃縮儀、研磨機、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內的80個余廠家。